2016-122
2016-120
免疫細胞的分離技術(shù)外周血單個核細胞的分離用體外方法對機體各種具有免疫反應(yīng)的細胞分別作鑒定、計數(shù)和功能測定,是觀察機體免疫狀態(tài)的一種重要手段。為此,須將各種參與免疫反應(yīng)的細胞從血液或臟器中分離出來。參與免疫反應(yīng)的細胞主要包括淋巴細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等。實驗根據(jù)不同需求有的僅需分離白細胞,有的則需分離單個核細胞(mononuclearcell),其中含淋巴細胞和單核細胞(monocyte),有的則需分離T細胞和B細胞以及其亞群。白細胞包括以下細胞外周血中單個核細胞包括淋巴細...
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2016-15
DNALoadingBuffer貨號:D1010規(guī)格:5ml/100ml保存:室溫保存,有效期少12個月。產(chǎn)品簡介:本產(chǎn)品是6倍濃縮的DNA上樣緩沖液,用于DNA凝膠電泳,能促使DNA樣品沉入凝膠加樣孔中。其主要成份為甘油,EDTA,溴酚藍和二甲苯青等。溴酚藍和二甲苯青用作電泳時的指示劑,可指示電泳進程。使用說明:1、請按每5微升DNA樣品加入1微升6×DNALoadingBuffer上的比例(6倍稀釋)來使用。2、混勻后,直接加到DNA凝膠加樣孔中,電泳。注意事項:1、如果...
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2015-1219
一抗體稀釋,主要用來稀釋*抗體,稀釋過的一抗可4度保存3-6個月。主要含有蛋白穩(wěn)定劑,PBS,疊氮鈉等,不適合于稀釋酶標記抗體及待標記抗體。酶標抗體稀釋液只適合于稀釋對應(yīng)的抗體,稀釋過的抗體可4度保存3-6個月。熒光抗體稀釋液稀釋過的熒光抗體可4度避光保存一周。免疫熒光抗體稀釋液(ImmunofluorescenceStainingAntibodyDilutionBuffer)可以用于免疫熒光實驗時熒光標記抗體的稀釋和配制。產(chǎn)品添加了抗體保護劑、穩(wěn)定劑等成分,有效增加了稀釋后...
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2015-121
WB常見問題常見問題解決對策及注意事項兩快玻璃板之間灌膠,膠總是不平玻璃沒有洗干凈,應(yīng)該要洗得非常干凈過硫酸銨和TEMED的加量不合適,加量相對較多,凝膠凝固過快,也會造成膠不平現(xiàn)象加完試劑以后沒有很好的搖勻,導(dǎo)致有些部位的聚合劑濃度過高,聚合相對較快造成膠不平膠總是漏避免玻璃邊緣(與膠條接觸處)破損膠條一定要干,跑完電泳后,膠條就放在實驗臺上晾著。下面的膠條注意不要老化,如果有裂紋的話用保鮮膜墊在上面,也可以有效防止漏膠將兩塊玻板擺放*對齊,底部處于同一個平面膜上有明顯氣泡...
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2015-121
轉(zhuǎn)印緩沖液提供了電極之間的電連續(xù)性,其必須是導(dǎo)電的。它還提供了一個化學(xué)環(huán)境,能維持蛋白質(zhì)的溶解度,又不妨礙轉(zhuǎn)移過程中蛋白質(zhì)吸附到膜上。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)印緩沖液包含緩沖系統(tǒng)和甲醇。Tris甘氨酸緩沖液,常用于槽轉(zhuǎn)印系統(tǒng)中。這種緩沖液的pH值為8.3,比大多數(shù)蛋白的等電點(pI)要高。在凝膠上分離的蛋白質(zhì)帶負電荷,向陽極遷移。由于槽內(nèi)的緩沖液是混合的,故轉(zhuǎn)移過程中的離子分布保持相對恒定。在蛋白測序應(yīng)用中,建議使用10mMCAPS緩沖液(pH=11)。凝膠電泳緩沖液中殘留的甘氨酸導(dǎo)致蛋白測...
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2015-121
轉(zhuǎn)印膜:用于蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢驗過程的微孔膜。Southernblot:又稱Southern印跡雜交,是研究DNA圖譜的基本技術(shù)。Northernblot:又稱Northern印跡雜交,是檢測RNA的基本技術(shù)。Westernblot:又稱Western印跡雜交,是蛋白質(zhì)檢測分析的基本技術(shù)。轉(zhuǎn)印膜在蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢測過程中應(yīng)用廣泛,不同的轉(zhuǎn)印膜規(guī)格和參數(shù)不同,選擇正確、均一穩(wěn)定的轉(zhuǎn)印膜對達到的實驗結(jié)果起到關(guān)鍵性的作用。常用的三種轉(zhuǎn)印膜:硝酸纖維素膜(NC膜)、帶正電的...
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2015-121
單克隆技術(shù)又名雜交瘤技術(shù)。由G.K?hler和Milstein1975年創(chuàng)立。主要原理是利用產(chǎn)生抗體的B細胞與腫瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞,生產(chǎn)抗體。單克隆抗體的制備過程主要有以下六個環(huán)節(jié),具體為抗原指標、免疫動物選擇、免疫程序的確定、免疫、細胞雜交與選擇培養(yǎng)。單抗制備步驟1、抗原制備制備單克隆抗體的免疫抗原,從純度上說雖不要求很高,但高純度的抗原使得到所需單抗的機會增加,同時可以減輕篩選的工作量。因此,免疫抗原是越純越好,應(yīng)根據(jù)所研究的抗原和實驗室的條件來決定。2、免疫動物...
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