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CCK-8實驗注意事項及相關(guān)問題

CellCountingKit-8簡稱CCK-8試劑盒，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗?；盍τ嬎悖?細(xì)胞活力（％）=[A(加藥)－A(空白)]／[A(0加藥)－A(空白)]×100A（加藥）：具有細(xì)胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度...

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IPTG配制的方法及使用說明

IPTG是一種作用*的誘導(dǎo)劑，不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實驗室廣泛應(yīng)用。IPTG溶液的配制很簡單：在8ml蒸餾水中溶解2gIPTG后，用蒸餾水定容10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。IPTG的使用方法：先把IPTG配制成24mg/ml（100mM）的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal（20?mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100μl的Amp（100mg/...

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結(jié)晶紫染液的配制方法

結(jié)晶紫染色液(CrystalVioletStainingSolution)是一種組織或細(xì)胞染色時常用的可以把細(xì)胞核染成深紫色的染色液。結(jié)晶紫是一種堿性染料，可以和細(xì)胞核中的DNA結(jié)合，從而產(chǎn)生細(xì)胞核染色。結(jié)晶紫染液的配制方法如下：結(jié)晶紫染液的配制結(jié)晶紫(crystalviolet)液：結(jié)晶紫乙醇飽和液(結(jié)晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸銨水溶液80mL將兩液混勻置24h后過濾即成。結(jié)晶紫染液使用方法1.樣品處理a)對于石蠟切片：二甲苯中脫蠟5-10分鐘。換...

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結(jié)晶紫指示劑變色范圍是多少

結(jié)晶紫（又叫甲基紫，俗名紫藥水）pH0.5(綠)～2.0(藍(lán))。以冰醋酸作溶劑，用酸滴定液滴定堿時，常用的指示劑為結(jié)晶紫，還有α－萘酚苯甲醇（0.2％冰醋酸溶液，其堿式色為黃色，酸式色為綠色）和喹哪啶紅（0.1％甲醇液，其堿式色為紅色，酸式色為無色）結(jié)晶紫性狀:具有金屬光澤的暗綠色結(jié)晶形粉末。熔點為215℃（分解）。溶于水、乙醇和三氯甲烷,溶液呈紫色。不熔于，濃酸中呈黃色，當(dāng)pH值增大時其顏色變化是黃→綠→藍(lán)→紫.與Sn4＋、Tl3＋、Au3＋和Sb3＋的鹵絡(luò)陰離子及MoO、...

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常見的指示劑有哪些

不同的指示劑在不同的酸堿環(huán)境下呈現(xiàn)不同的顏色。指示劑的分類1、酸堿指示劑。指示溶液中H+濃度的變化，是一種有機弱酸或有機弱堿，其酸性和堿性具有不同的顏色。指示劑酸HIn在溶液中的離解常數(shù)Ka=[H+][In-]/[HIn]，即溶液的顏色決定于[In-]/[HIn]，而[In-]/[HIn]又決定于[H+]。以甲基橙（Ka=10-3.4）為例，溶液的pH4.4時，呈堿性，具黃色；而在pH3.1～4.4，則出現(xiàn)紅黃的混合色橙色，稱之為指示劑的變色范圍。不同的酸堿指示劑有不同的變色...

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總結(jié)實驗室常用染色液的制備方法

染色液是實驗室中常用的試劑之一，分為天然染液和人工染料，也分堿性染料和酸性染料，以下來詳細(xì)介紹一下實驗室常見染色液的配制。⒈碘-碘化鉀（I2-KI）溶液能將淀粉染成藍(lán)紫色，蛋白質(zhì)染成黃色，也是植物組織化學(xué)測定的重要試劑。配方：碘化鉀2g；蒸餾水300ml；碘1g先將碘化鉀溶于少量蒸餾水中，待全溶解后再加碘，振蕩溶解后稀釋300mL，保存在棕色玻璃瓶內(nèi)。用時可將其稀釋2-10倍，這樣染色不致過深，效果更佳。⒉蘇丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪、揮發(fā)油、樹...

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熒光免疫染色和DAPI染色實驗步驟

免疫染色實驗方法和步驟免疫染色(immunolstaining)包括免疫熒光(immunolfluorescence)、免疫組化(immunolhistochemistry)、免疫細(xì)胞化學(xué)(immunolcytochemistry)等，可以參考如下步驟進行操作。1.樣品準(zhǔn)備(Samplepreparation)對于貼壁細(xì)胞：可以直接用多孔板，例如6孔板、24孔板等，培養(yǎng)細(xì)胞，然后到預(yù)定時間時進行固定等后續(xù)操作。也可以用潔凈的蓋玻片，70%乙醇中浸泡后，用無菌的鑷子放置到6孔板...

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DAPI染DNA的原理及使用方法（包含DAPI配制）

DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式為C16H15N5·2C3H6O3，分子量457.48。DAPI是一種能夠與DNA強力結(jié)合的熒光染料。它結(jié)合到雙鏈DNA小溝的AT堿基對處，一個DAPI分子可以占據(jù)三個堿基對的位置。結(jié)合到雙鏈DNA上DAPI分子的熒光強度提高大約20倍，常用與熒光顯微鏡觀測，根據(jù)熒光的強度可以確定DNA的量。另外，因為DAPI可以透過完整的細(xì)胞膜，它可...

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