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MTT法檢測細(xì)胞活性步驟及原理

要知道MTT法檢測細(xì)胞活性步驟先要知道MTT是什么？MTTMTT是一種粉末狀化學(xué)試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學(xué)名為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍(lán)。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細(xì)胞活性原理檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此...

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瓊脂糖凝膠電泳常見問題

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳常見為題都有哪些？、一、DNA帶模糊、1、DNA降解：瓊脂糖凝膠電泳試驗(yàn)中要避免核酸酶污染2、電泳緩沖液陳舊：電泳緩沖液多系使用后，離子強(qiáng)度降解，PH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳實(shí)驗(yàn)，建議經(jīng)常更換電泳緩沖液。3、所用電泳條件不合適：電泳時電壓不應(yīng)超過20V/cm，溫度4、DNA上揚(yáng)量過多：應(yīng)減少凝膠中DNA上樣量。...

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瓊脂糖凝膠電泳條件

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法.其分析原理與其他支持物電泳的主要區(qū)別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過時會受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當(dāng)大，對大多數(shù)蛋白質(zhì)來說其分子篩效應(yīng)微不足道，現(xiàn)廣泛應(yīng)用于核酸的研究中。瓊脂糖凝膠電泳條件電泳緩沖液的pH在6~9之間，離子強(qiáng)度0.02~0.05為...

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瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配制

瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過時會受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。在瓊脂糖凝膠電泳緩沖液又幾種適用于天然雙鏈DNA的電泳。瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配置常見瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配制（如圖）TBE通常作為5×或10×的貯存液配制和貯存。這種濃的貯存液pH應(yīng)為8.3左右，它在應(yīng)用前稀釋，并用同一種貯存液制備凝膠溶液和瓊脂糖凝膠電泳緩沖液。上述三種電泳緩沖液都比較好...

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聚丙烯酰胺凝膠電泳原理以及注意事項(xiàng)

聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE（Polyacrylamide?gel?electrophoresis）聚丙烯酰氨凝膠電泳，是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的一種常用電泳技術(shù)。聚丙烯酰胺凝膠由單體丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成，聚合過程由自由基催化完成。聚丙烯酰胺凝膠電泳作用：用于分離蛋白質(zhì)和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝膠電泳原理：常用的催化聚合方法有兩種：化學(xué)聚合和光聚合。化學(xué)聚合通常是加入催化劑過硫酸銨（AP）以及加速劑四甲基乙二胺（TEMED），四甲基乙二胺催化過硫酸銨產(chǎn)生自...

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MRS培養(yǎng)基的配制方法及原理

MRS培養(yǎng)基常用于食品中乳酸菌總數(shù)測定，自然pH通常是6.2—6.4，在做乳酸菌分離的時候直接使用自然pH就可以了，如果是做純培養(yǎng)，希望得到交好的菌落，或者是做液體培養(yǎng)，希望得到較多菌體的話，就把pH跳到6.7左右為佳。MRS培養(yǎng)基的原理蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子；葡萄糖為可發(fā)酵糖類；磷酸氫二鉀為酸堿緩沖劑；檸檬酸氫二銨、硫酸鎂、硫酸錳、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子，其成分還能抑制某些雜菌；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。MRS培養(yǎng)基的配制蛋...

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MRS培養(yǎng)基成分

MRS培養(yǎng)基成分蛋白陳10.0g牛肉粉5.0g酵母粉4.0g葡萄糖20.0g吐溫801.0mL磷酸氫二鉀2.0g乙酸鈉5.0g檸檬酸三銨2.0g硫酸鎂0.2g硫酸錳0.05g瓊脂粉15.0g蒸餾水1000mL改良MRS培養(yǎng)基成分：胰蛋白胨10g磷酸氫二鉀2g葡萄糖20g無水醋酸鈉3g牛肉浸膏10g檸檬酸三銨2g酵母浸膏5g七水硫酸鎂0.2gX-Gal0.06mg吐溫-801mlL-半胱氨酸0.5g水或MJH水提液1000ml備注：培養(yǎng)基消后用5NNa0H調(diào)pH6.8；MRS培...

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MS培養(yǎng)基成分

MS培養(yǎng)基是目前使用普遍的培養(yǎng)基，用于植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。其具有較高的無機(jī)鹽濃度，能夠保證組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長。ME培養(yǎng)基的成分MS培養(yǎng)基的無機(jī)養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適，足以滿足植物細(xì)胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。因此，一般情況下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分。和其它培養(yǎng)基的基本成分相比，MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高，這是它的顯著特點(diǎn)。

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