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電極緩沖液中甘氨酸的作用

甘氨酸同Tris（三羥甲基氨基甲烷）一起組成電泳緩沖液中的緩沖對(duì)，可以穩(wěn)定電泳過(guò)程中的PH值。在SDS-PAGE不連續(xù)電泳中，制膠緩沖液使用的是Tris-HCL緩沖系統(tǒng)，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9;而電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統(tǒng)。在濃縮膠中，其pH環(huán)境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場(chǎng)的作用下，泳動(dòng)效率低;而CL離子卻很高，兩者之間形成導(dǎo)電性較低的區(qū)帶，蛋白分子就介于二者之間泳動(dòng)。由于導(dǎo)電性與電場(chǎng)強(qiáng)度成反比，這一區(qū)帶便形成了較高的電壓梯度，壓著蛋白質(zhì)...

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Parafilm封口膜怎么使用

Parafilm封口膜具有柔軟性，可塑性，防止水分流失，自動(dòng)密封性，無(wú)味，容易切割，熱塑性塑料，半透明，無(wú)色等特點(diǎn)。可以快速有效地密封實(shí)驗(yàn)器皿。具有防水防濕的性能，有效阻止樣品發(fā)揮和污染。有效保護(hù)無(wú)水物質(zhì)?？梢灾貜?fù)折疊使用，纏繞在尖銳外形物體上也不會(huì)被撕裂。具有良好韌性，21℃時(shí)也可拉伸接近兩倍的長(zhǎng)度。隨溫度身高，繞韌性和柔軟度相應(yīng)提升。不耐高溫，68℃時(shí)將會(huì)軟化具有粘性。物理性質(zhì):Parafilm封口膜是半透明的，有柔性的，熱塑性塑料，高性能防水材料，本身為無(wú)色，無(wú)嗅，無(wú)味...

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植物蛋白質(zhì)提取方法總匯

植物蛋白質(zhì)提取方法總匯植物蛋白是蛋白質(zhì)的一種，來(lái)源是從植物里提取的，營(yíng)養(yǎng)與動(dòng)物蛋白相仿，但是更易于消化。含植物蛋白豐富的是大豆。但在飲食中，植物蛋白和動(dòng)物蛋白要搭配食用。植物蛋白盡管一般不如動(dòng)物蛋白好，但仍是人類(lèi)膳食蛋白質(zhì)的重要來(lái)源。谷類(lèi)一般含蛋白質(zhì)6%-10%，不過(guò)其中必需氨基酸種或多種含量低（限制氨基酸）。薯類(lèi)含蛋白質(zhì)2%-3%。某些堅(jiān)果類(lèi)如花生、核桃、杏仁和蓮子等則含有較高的蛋白質(zhì)（15%-30%）。豆科植物如某些干豆類(lèi)的蛋白質(zhì)含量可高達(dá)40%左右。特別是大豆在豆類(lèi)中更...

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轉(zhuǎn)鐵蛋白應(yīng)用

轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin）Cas；11096-37-0轉(zhuǎn)鐵蛋白是血液中一種主要的糖蛋白,負(fù)責(zé)將肝組織(是鐵貯藏的主要場(chǎng)所)的鐵向其它組織的細(xì)胞運(yùn)輸。沒(méi)有結(jié)合鐵的轉(zhuǎn)鐵蛋白稱(chēng)作脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apotransferrin),它能夠緊緊結(jié)合兩個(gè)Fe3,此時(shí)稱(chēng)為鐵結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白(ferrotransferrin)。所有生長(zhǎng)中的細(xì)胞表面都有鐵結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白的受體,在中性pH條件下轉(zhuǎn)鐵蛋白與鐵結(jié)合,然后通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。在細(xì)胞內(nèi),在內(nèi)體的酸性環(huán)境下,轉(zhuǎn)鐵蛋白釋放出鐵,但是仍與膜受體...

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RNAwait（非凍型組織RNA保存液）

RNAwait是一種無(wú)毒的可直接使用的樣品儲(chǔ)存液，能使細(xì)胞內(nèi)的RNA與RNA酶分離，可以快速可靠地保存動(dòng)物組織、細(xì)胞內(nèi)的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中，在室溫可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃標(biāo)本可以長(zhǎng)期保存，RNA穩(wěn)定存在不降解，取出后用各類(lèi)方法抽提可以獲得高質(zhì)量的RNA。操作流程：1.根據(jù)要保存的各樣本的體積，計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍（如100mg組織約用1mlRNAwait）。2.將RNA...

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Tris飽和酚配制及作用

Tris飽和酚是用Tris-HCl（pH8.0）飽和過(guò)的重蒸酚，為淺黃色透明液體，有刺激性氣味，上層為T(mén)ris鹽酸緩沖液，pH7.8，下層為酚相，內(nèi)加有抗氧化的8-羥基喹啉。Tris飽和酚用于分離DNA。Tris飽和酚的配置：冰箱取出重蒸酚,室溫放置，之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中，以防玻璃炸裂，加8－羥基喹啉0.1％和β－巰基乙醇0.2％,（原液14.4MOL/ML），混勻，溶液呈現(xiàn)黃色，倒入分液漏斗中（也可在燒杯中進(jìn)行）加入等溶劑的1MOL/ML的Tris...

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詳解單克隆抗體的制備過(guò)程（索萊寶實(shí)驗(yàn)室）

單克隆技術(shù)又名雜交瘤技術(shù)。由G.K?hler和Milstein1975年創(chuàng)立。主要原理是利用產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞雜交融合成雜交瘤細(xì)胞，生產(chǎn)抗體。單克隆抗體的制備過(guò)程主要有以下六個(gè)環(huán)節(jié)，具體為抗原指標(biāo)、免疫動(dòng)物選擇、免疫程序的確定、免疫、細(xì)胞雜交與選擇培養(yǎng)。下面詳細(xì)介紹單克隆抗體制備過(guò)程每一步的做法。1、抗原制備制備單克隆抗體的免疫抗原，從純度上說(shuō)雖不要求很高，但高純度的抗原使得到所需單抗的機(jī)會(huì)增加，同時(shí)可以減輕篩選的工作量。因此，免疫抗原是越純?cè)胶?，?yīng)根據(jù)所研究的抗原和...

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Western Blot內(nèi)參抗體如何選擇

內(nèi)參抗體種類(lèi)很多，比如beta-actin、beta-tubunlin、GAPDH、α-tubunlin等，那么針對(duì)自己的實(shí)驗(yàn)，我們?cè)撊绾芜x擇呢?下面簡(jiǎn)單介紹下選擇內(nèi)參抗體應(yīng)遵循的原則：一.樣本種屬來(lái)源：先要考慮的就是實(shí)驗(yàn)樣本來(lái)源于什么物種。1、哺乳動(dòng)物的組織或者細(xì)胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物來(lái)源實(shí)驗(yàn)樣本，則可以選擇plantactin、Rubisco等。3、其他來(lái)源樣本研究...

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