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RNA的提取方法大總結(jié)

RNA的提取方法大總結(jié)這篇文章主要講的是幾種常用的RNA提取方法。1、異硫氰酸胍氯化銫超速離心法原理：使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì)，進(jìn)行密度梯度超速離心，RNA沉淀于管底，而DNA與蛋白質(zhì)在上清中。使用這種方法，不但能得到高質(zhì)量的RNA，而且能同時分離出細(xì)胞染色體DNA.本法對于冷凍時間長、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不易分離的組織標(biāo)本以及富含RNA酶的組織細(xì)胞（如胰腺）的RNA提取尤其適合。此法提取的RNA的質(zhì)量好和成功率高...

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抗體洗脫液的原理介紹

抗體洗脫液的原理介紹日益增長的抗體使用，研究目的蛋白種類一日千里，那么膜的再使用能夠節(jié)約研究時間，推進(jìn)研究進(jìn)程，在不影響實(shí)驗準(zhǔn)確的前提下，那么在使用的意義是很明顯的?，F(xiàn)在這里我來講一下抗體洗脫液--strippingbuffer。在介紹抗體洗脫液的原理前，先來看看抗原抗體結(jié)合的一些環(huán)境條件吧，通常我們的抗體稀釋液選擇是：TBST和PBST，這里的兩種抗體稀釋液的pH值均在7.4-7.8之間。那么問題就來了，為什么抗體稀釋液的pH值是這樣的呢？抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)：抗原與抗體能夠...

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簡述tbst與pbst的區(qū)別及配置

簡述tbst與pbst的區(qū)別及配置TBST是TBS+Tween的縮寫，生物實(shí)驗中提到的PBST是指PBS溶液加上Tween-20。那么tbst與pbst都有上面區(qū)別呢？tbst與pbst的區(qū)別：1、TBST的pH值隨溫度變化大一點(diǎn)，而PBST似乎容易有沉淀，若稀釋抗體后需要反復(fù)使用的話建議使用TBST溶解。2、兩種洗液用起來沒有什么區(qū)別，都是提供一個緩沖的PH值環(huán)境，加上吐溫20有助于蛋白的洗脫。PBST的磷酸鹽緩沖液加Tween-20，而TBST是Tris緩沖液加Tween...

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Western Blot內(nèi)參抗體選擇原則

WesternBlot內(nèi)參抗體選擇原則內(nèi)參抗體種類很多，比如beta-actin、beta-tubunlin、GAPDH、α-tubunlin等，那么針對自己的實(shí)驗，我們該如何選擇呢?下面簡單介紹下選擇內(nèi)參抗體應(yīng)遵循的原則：一.樣本種屬來源：先要考慮的就是實(shí)驗樣本來源于什么物種。1、哺乳動物的組織或者細(xì)胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物來源實(shí)驗樣本，則可以選擇plantactin、...

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Tris的主要應(yīng)用及緩沖能力

Tris的主要應(yīng)用及緩沖能力Tris中文名稱：三（羥甲基）氨基甲烷英文名稱：Tris;Tris(Hydroxymethyl)aminomethaneTris是一種有機(jī)化合物，白色微黃色結(jié)晶性粉末或塊，化學(xué)式C4H11NO3，溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，不溶于四氯化碳。25°C時溶解度（mg/mL）：水550、乙二醇79.1、甲醇26、無水乙醇14.6、95%乙醇22.0、N，N-二甲基甲酰胺14，戊醇2.6，丙醇2.0，乙酸乙酯0.5、環(huán)己烷0.1。水溶液不吸收二氧化碳...

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干酪素的性狀及用途

干酪素的性狀及用途英文名稱：casein。別名：乳酪素，酪蛋白，酪脘，酪素。干酪素的性狀：干酪素為白色無定形粉末或顆粒。是一種含磷復(fù)合蛋白。經(jīng)電泳分析有不少于20中的磷蛋白組分，主要成分為α-酪蛋白和β-酪蛋白。干粉無臭，無味。有吸濕性。干燥時性質(zhì)穩(wěn)定，潮濕時易變壞。溶于堿性水溶液，溶于濃鹽酸呈淺紫色，幾乎不溶于水和非極性有機(jī)溶劑。相對密度1.25～1.31，等電點(diǎn)4.7。干酪素的制備方法：（1）新鮮牛奶脫脂，加酸（乳酸、乙酸、鹽酸或硫酸），將pH調(diào)4.7，使干酪素微膠粒失去...

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淀粉知多少

淀粉知多少淀粉是我們?nèi)粘Ｉ钪薪?jīng)常接觸到的物品，但它并不像我們想象中的那么簡單。淀粉都有種類呢？它們又有哪些區(qū)別？下面我們主要了解以下三種淀粉：1、直鏈淀粉2、支鏈淀粉3、可溶性淀粉。共同特點(diǎn)：白色粉末狀（可溶性淀粉優(yōu)勢也呈淡黃色）；無臭，無味；有吸濕性；不溶于冷水、乙醇不同點(diǎn)：1、結(jié)構(gòu)上：直鏈淀粉是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷鍵連接的多糖鏈，支鏈淀粉是借a-(1，4)糖苷鍵和4%的a-(1，6)糖苷鍵相連的支鏈葡萄糖單位組成的?？扇苄詭谭塾址Q為淀粉糊精，是淀粉經(jīng)過一定...

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果膠酶的化學(xué)性質(zhì)及用途介紹

果膠酶的化學(xué)性質(zhì)及用途介紹果膠酶廣泛分布于高等植物和微生物中，本質(zhì)上是聚半乳糖醛酸水解酶,果膠酶水解果膠主要生成β-半乳糖醛酸,可用次碘酸鈉法進(jìn)行半乳醛酸的定量,從而測定果膠酶活力。果膠酶的化學(xué)性質(zhì)：一般為灰白色粉末，或棕黃色液體。商業(yè)用果膠酶的有效成分主要有三種酶。一種是果膠甲酯酶(Pectinpectylhydrolase)(EC3.1.1.11)，主要作用為催化甲酯果膠以脫去甲酯基，產(chǎn)生聚半乳糖醛酸苷鍵和甲醇。另一種是聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase；...

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